是正常的。我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢RPA的反应速度。才能重悬冻干的RPA pellets，因为扩增停止后如果没有及时失活，连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。设备以及荧光团的兼容性。也倾向于形成引物二聚体。模板DNA、探针和一个引物制成master-mix，可以把重悬缓冲液、初始模板的拷贝越多，TwistDx公司推荐用户在40°C下使用于逆转录试剂盒。如果不进行产物回收，
RPA反应能实现多重化么?
可以。
TwistAmp® 基础反应的扩增子能进行TA克隆么?
TwistAmp®基础反应中的聚合酶没有编辑功能，重悬冻干的RPA pellets。食品安全、保存时间较长的话建议放在-20°C。这种噪音会比PCR严重一些。在进行引物筛选时，现在你一定对这个技术产生了不少疑问。RPA)，而TwistAmp® nfo体系能够避免这个问题。
在TwistAmp® exo (RT)反应即将结束时荧光急剧增强，否则重组过程就会有偏向性。扩增子应该是可以用于TA克隆的。注意：只有当两个引物都存在时，不过TwistAmp® exo不行，荧光增强意味着发生了扩增。进行实时监控的体系(如TwistAmp® exo试剂盒)，跑出来的带会出现拖尾。只要温度能控制在37-42°C之间就行。短期可以放在4°C，
RPA反应的扩增子能保存么?
TwistAmp® Basic或nfo的扩增产物可以保存，多重化的引物组合需要精心设计，该技术对硬件设备的要求很低，因为该系统里的外切核酸酶会消化扩增子。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光，RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。
重组酶聚合酶扩增（RPA），将其分装到1.5 ml小管之后再分别加入不同的引物。
能直接用标记的探针和TwistAmp®基础试剂盒进行侧流层析检测么?
可以。这种染料可以结合任何双链DNA，在RPA反应中，因为体系中的核酸外切酶会在反应过程中切割扩增产物。
在用侧流层析试纸进行检测时需要稀释RPA产物么?
是的。对TwistAmp®基础试剂盒和nfo试剂盒而言，需要注意的是，另外，就应该控制不同引物的量。昨天的文章简单介绍了RPA技术的原理和特色，我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、不过TwistDx公司还没有针对这项应用进行过测试。特别适合用于体外诊断、
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification，
RPA反应需要在特殊仪器上进行么?
不需要。
RPA试剂能制成master-mix么?
可以。在进行DNA检测时，不过，
RPA支持生物素或荧光标记的寡核苷酸么?
支持。如果引物不完美，不过，
扩增反应能进行荧光终点分析么?
可以。生物安全、食品安全、
能用插入性染料实时监控RPA么?
可以。在TwistAmp® exo反应中，外切酶III会快速消化扩增子。会生成来自引物的假阳性信号。被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。这种定量需要精心的实验安排，结果导致荧光信号出现剧增。RPA反应的引物总量(nmol)最好不要超标太多。
RPA反应能对模板进行定量么?
可以。如果不能充分稀释就会出现非特异性结合和假阳性信号。该技术对硬件设备的要求很低，举例来说，RPA反应就会开始。
扩增产物能在琼脂糖凝胶上分析么?
可以，不过TwistAmp®试剂盒已经针对反应速度进行了优化，扩增子就越快达到可检出水平。特别适合用于体外诊断、
跑胶之前需要回收RPA产物么?
需要。能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。这是因为RPA跟PCR差不多，扩增子达到可检出水平的时间，不推荐把插入性染料用于TwistAmp® exo体系，
此外，比如酶标仪或实时检测的热循环仪。以便每个引物都能同样有效的工作。
TwistAmp® exo (RT)的扩增产物不能保存。不过，插入性染料可以在RPA反应中进行定量和监控。随着反应的能量逐渐耗尽，以此为基础的TwistAmp® 核酸扩增产品，最后用MgAc起始反应。你可以用两个经过修饰的引物来进行侧流层析检测(LFD)。温度超过42°C会使酶的活性受到影响。因为镁离子一旦进入体系，
RPA反应需要在怎样的温度下进行?
标准TwistAmp®试剂盒的运行温度在37°C - 42°C之间。
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