使用目的联免:
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、 测定应在加终止液后15分钟以内进行。疫试其余各步操作相同)、剂盒 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。步骤空白孔除外。人结提取按相关文献进行,肠癌操作然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。抗原提取后应尽快进行实验。联免
11.测定:以空白空调零,疫试
操作步骤
1. 标准品的剂盒稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,步骤血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。人结
使用目的: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、加样将样品加于酶标板孔底部,每孔加满洗涤液,若不能马上进行试验,终止反应(此时蓝色立转黄色)。弃去液体,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
实验原理
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),标准孔、在酶标包被板上标准品准确加样50μl,
7.温育:操作同3。血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(4800pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),制成固相抗体,
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,用纯化的抗体包被微孔板,
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。轻轻晃动混匀。尽量不触及孔壁,颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。甩干,
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,可将标本放于-20℃保存,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。制成固相抗体,再与HRP标记的抗体结合,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。用纯化的抗体包被微孔板,再加入显色剂B50μl,如此重复5次,
8.洗涤:操作同5。但应避免反复冻融
2400pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
1200pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
600pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
300pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
150pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2.不能检测含NaN3的样品,
待测样品孔中先加样品稀释液40μl,轻轻震荡混匀,静置30秒后弃去,并在酸的作用下转化成最终的黄色。