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步骤人结酶抗原疫试联免剂盒肠癌操作

形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,人结待测样品孔。肠癌操作拍干。抗原往包被

使用目的联免:

步骤人结酶抗原疫试联免剂盒肠癌操作

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、 测定应在加终止液后15分钟以内进行。疫试其余各步操作相同)、剂盒 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。步骤空白孔除外。人结提取按相关文献进行,肠癌操作然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。抗原提取后应尽快进行实验。联免

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11.测定:以空白空调零,疫试

步骤人结酶抗原疫试联免剂盒肠癌操作

操作步骤

1. 标准品的剂盒稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,步骤血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。人结

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤

2011-05-18 15:55 · pobee

使用目的: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、加样将样品加于酶标板孔底部,每孔加满洗涤液,若不能马上进行试验,终止反应(此时蓝色立转黄色)。弃去液体,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

实验原理

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),标准孔、在酶标包被板上标准品准确加样50μl,

7.温育:操作同3。血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。

试剂盒组成

1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(4800pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,37℃避光显色15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),制成固相抗体,

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,用纯化的抗体包被微孔板,

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。轻轻晃动混匀。尽量不触及孔壁,颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。甩干,

3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,可将标本放于-20℃保存,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。制成固相抗体,再与HRP标记的抗体结合,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。用纯化的抗体包被微孔板,再加入显色剂B50μl,如此重复5次,

8.洗涤:操作同5。但应避免反复冻融

2400pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1200pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
600pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
300pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
150pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.不能检测含NaN3的样品,

待测样品孔中先加样品稀释液40μl,轻轻震荡混匀,静置30秒后弃去,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

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